dna損傷檢測試劑盒的使用流程來學(xué)習(xí)下吧

　　dna損傷檢測試劑盒的關(guān)鍵技術(shù)參數(shù)包括板內(nèi)差異、板間差異、批間差異、重復(fù)性、特異性、散布反應(yīng)、回收率等。如果經(jīng)常進行ELISA檢測，建議使用同一個試劑盒。制造商，以盡可能保證數(shù)據(jù)的可重復(fù)性（當(dāng)然，條件是測試條件的一致性）。至于用于科研的ELISA試劑盒，不同廠家使用的抗體對、酶和底物、生產(chǎn)技術(shù)和開發(fā)實力不同，不同廠家的試劑盒測得的數(shù)據(jù)也會不同。

　　dna損傷檢測試劑盒的使用流程：

　　1、標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋與加樣:在酶標(biāo)包被板上設(shè)標(biāo)準(zhǔn)品孔10孔，在第、第二孔中分別加標(biāo)準(zhǔn)品100μl，然后在第、第二孔中加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl，混勻;然后從第孔、第二孔中各取100μl分別加到第三孔和第四孔，再在第三、第四孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl，混勻;然后在第三孔和第四孔中先各取50μl棄掉，再各取50μl分別加到第五、第六孔中，再在第五、第六孔中分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50ul，混勻;混勻后從第五、第六孔中各取50μl分別加到第七、第八孔中，再在第七、第八孔中分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl，混勻后從第七、第八孔中分別取50μl加到第九、第十孔中，再在第九第十孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl，混勻后從第九第十孔中各取50μl棄掉。(稀釋后各孔加樣量都為50μl，濃度分別為180ng/L，120ng/L，60ng/L，30ng/L，15ng/L)。

　　2、加樣:分別設(shè)空白孔(空白對照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑，其余各步操作相同)、待測樣品孔。在酶標(biāo)包被板上待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl，然后再加待測樣品10μl(樣品終稀釋度為5倍)。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動混勻。

　　3、溫育:用封板膜封板后置38℃溫育30分鐘。

　　4、配液:將30(48T的20倍)倍濃縮洗滌液用蒸餾水30(48T的20倍)倍稀釋后備用。

　　5、洗滌:小心揭掉封板膜，棄去液體，甩干，每孔加滿洗滌液，靜置30秒后棄去，如此重復(fù)5次，拍干。

　　6、加酶:每孔加入酶標(biāo)試劑50μl，空白孔除外。

　　7、溫育:操作同3。

　　8、洗滌:操作同5。

　　9、顯色:每孔先加入顯色劑A50μl，再加入顯色劑B50μl，輕輕震蕩混勻，37℃避光顯色15分鐘.

　　10、終止:每孔加終止液50μl，終止反應(yīng)(此時藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色)。

　　11、測定:以空白空調(diào)零，450nm波長依序測量各孔的吸光度(OD值)。測定應(yīng)在加終止液后15分鐘以內(nèi)進行。