在免疫組化檢測過程中，許多樣本組織會產生可通過各種波長濾光片的組織內源性自發熒光，干擾抗體標記的目的蛋白熒光的觀察，甚至導致實驗失敗。為了解決免疫組化實驗中的自發熒光，VectorLabs公司專門開發了一款Vector® True VIEW™ Autofluorescence Quenching Kit試劑盒，該產品旨在去除組織切片中由于醛固定、紅細胞以及膠原蛋白/彈性蛋白結構造成的自發熒光。該試劑使用方便，無需稀釋操作，為即用型試劑。 該試劑盒中含有防自發熒光效果excellent的VECTASHIELD Vibrance Antifade Mounting Media 封片劑（含或不含DAPI兩種）。客戶無需單獨購買封片劑，經濟、實用。
注意：該試劑盒對脂褐素造成的組織自發熒光無效。
● 試劑盒組成：
a. Vector®TrueVIEW™ Reagent A 5ml b. Vector®TrueVIEW™ Reagent B 5ml c. Vector®TrueVIEW™ Reagent C 5ml d. VECTASHIELD Vibrance Antifade Mounting Media 2ml e. VECTASHIELD Vibrance Antifade Mounting Media with DAPI 2ml
其中，貨號SP-8400包含a,b,c,d四個組分；貨號SP-8500包含a,b,c,e四個組分
● 產品使用方法：
| 將ReagentA、B、C以1:1:1的比例混合。（注意混合順序，先將A和B以1:1比例混合10s，再加入C,混勻10s） |
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| 將混好后的TrueView試劑滴加到組織樣本切片上，將樣本完-全覆蓋，孵育2-5min |
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| 使用PBS緩沖液洗片5次，除去多余緩沖液，VECTASHIELD Vibrance Media封片后觀察 |
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● 產品特征
A 顯著降低背景染色并保留特異性抗原染色； B 提高信噪比； C 產品穩定，儲存在滴瓶中，使用方便； D 操作簡單，快速；整個染色過程僅需2-5min； E 為使用者提供清晰、明確、真實的染色結果； F 適用于多種熒光染料的自發熒光去除，包括Alexa488，Alexa 594，DyLight 488，DyLight 594，FITC，Cyanine 5和GFP；
G SP-8500試劑盒中的封片劑中DAPI濃度較高，可對細胞核進行清晰的染色。
● 產品對自發熒光淬滅效果:
| ◆ 右圖為經Vector®TrueVIEW™kit處理后，人腎臟組織切片中自發熒光淬滅的百分比與處理時間之間的關系。 ◆ Note：2分鐘內即可達到最大淬滅效果。 |
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● 產品應用舉例：
＞ 案例一
| 未經任何處理 | 使用Vector®TrueVIEW™處理 |
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| ◆ 上圖為人脾臟組織染色結果：使用VectaFluor TM Duet試劑盒（DK-8818）檢測的mouse anti-CD20（red）和rabbit anti-Ki67（green）對人脾組織切片的染色。 ◆ 左圖為未經任何處理的染色結果， ◆ 右圖為使用TrueVIEW™Autofluorescence Quenching試劑盒染色結果。于未經處理的染色結果相比，經TrueVIEW™Autofluorescence Quenching試劑盒處理后，自發熒光顯著減少。 | |
＞ 案例二
| ◆ A-D圖為人腎臟切片（石蠟切片）染色結果，實驗中使用anti-AE1 /AE3抗體對角蛋白進行染色（綠色）。 ◆ A圖未經處理， ◆ B-D圖經TrueVIEW™Quencher Kit處理。自發熒光明顯減弱。延長曝光時間，陽性信號強度也隨之增強。 | |
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＞ 案例三
| 未經任何處理 | 使用TrueVIEW Treatment Mounted with Vibrance + 3x DAPI處理 |
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| ◆ 上圖為人胰腺組織染色結果：綠色為insulin的染色。 ◆ 左圖為未經任何處理的染色結果， ◆ 右圖為使用TrueVIEW Treatment Mounted with Vibrance + 3x DAPI（SP-8500）試劑盒染色結果。與未經處理的染色結果相比，經該試劑盒處理后，自發熒光顯著減少，核染色顯著增強。 | |
＞ 案例四
| 未經處理（內源性自發熒光） | 經TrueVIEW™Quencher Kit處理 |
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| Company A | Company B | Company C |
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| Copper Sulfate Solution | Sodium Borohydride | Sudan Black B |
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● 產品訂購信息 Vector® True VIEW™ Autofluorescence Quenching Kit
| 產品 | 貨號 | 規格 | 染色切片數 |
| Vector® True VIEW™ Autofluorescence Quenching Kit | SP-8400 | 15ml | 100-150 |
| Vector® True VIEW™ Autofluorescence Quenching Kit | SP-8500 | 15ml | 100-150 |
| VECTOR TrueVIEW Autofluorescence Quenching Kit (3ml) | SP-8403 | 3ml | ~30 |
| VECTASHIELD® HardSet™ Antifade Mounting Medium | H-1400 | 10ml | 100-150 |
| VECTASHIELD® HardSet™ with DPI Antifade Mounting Medium | H-1500 | 10ml | 100-150 |
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