Mirus活體核酸遞送(轉(zhuǎn)染)實(shí)驗(yàn)試劑簡(jiǎn)介

活體轉(zhuǎn)染是指可以直接應(yīng)用于動(dòng)物體的轉(zhuǎn)染方法。Mirus的活體核酸遞送(轉(zhuǎn)染)實(shí)驗(yàn)試劑專門為小鼠設(shè)計(jì)，可以將核酸安全高效地注入活體實(shí)驗(yàn)室小鼠，可用于基因敲除研究中siRNA的傳遞或肝臟中的基因表達(dá)研究的DNA傳遞。

TransIT®-QR Delivery Solution    MIR 5240

特點(diǎn)：

裸核酸傳遞-與聚賴氨酸和PEI方法相比，實(shí)現(xiàn)更高水平的基因表達(dá)。 

多功能平臺(tái)-用于DNA或siRNA傳遞，使用流體動(dòng)力尾靜脈注射進(jìn)小鼠體內(nèi)。 

超低細(xì)胞毒性:與生理鹽水注射相比，心臟輸出量損失最小，可在注射后(幾分鐘內(nèi))迅速恢復(fù)。 

TransIT-QR Delivery Solution將Label ITCy3 RNAi Delivery Control運(yùn)送到肝細(xì)胞。使用TransIT-QR Delivery Solution通過(guò)尾靜脈流體動(dòng)力學(xué)將25µg Label ITCy3 RNAi Delivery Control(紅色)運(yùn)送給小鼠。注射45分鐘后取肝切片固定，復(fù)染細(xì)胞核(藍(lán)色)和肌動(dòng)蛋白(綠色)。

與使用生理鹽水注射相比，TransIT-QR溶液最大限度地減少心輸出量的損失。將小鼠麻醉后與動(dòng)脈血壓計(jì)相連，通過(guò)使用流體動(dòng)力尾靜脈注射系統(tǒng)注射TransIT-QR遞送溶液（紅色）或生理鹽水（藍(lán)色）至小鼠體內(nèi)。以心率乘以脈壓（收縮壓和舒張壓之間的差）來(lái)估計(jì)相對(duì)心輸出量，并與注射前心輸出量進(jìn)行對(duì)比。

“增強(qiáng)表達(dá)”的體內(nèi)遞送試劑-TransIT-EE Delivery Solution  MIR 5340 

特點(diǎn)：

裸核酸傳遞-與TransIT- QR遞送試劑、TransIT- In Vivo基因傳遞系統(tǒng)、聚賴氨酸和PEI方法相比，實(shí)現(xiàn)更高的基因表達(dá)水平。
多功能平臺(tái)-適合使用流體動(dòng)力尾靜脈注射到小鼠中進(jìn)行DNA傳遞。

TransIT-EE試劑可增強(qiáng)肝臟中熒光素酶的表達(dá)。使用TransIT-QR或TransIT-EE遞送試劑10 μg熒光素酶表達(dá)載體通過(guò)流體動(dòng)力傳遞尾靜脈注射系統(tǒng)運(yùn)送給小鼠。注射24小時(shí)后收集肝臟并測(cè)定熒光素酶活性。 

TransIT-EE溶液可增強(qiáng)多種器官中熒光素酶的表達(dá)。使用TransIT-QR或TransIT-EE遞送液，采用流體動(dòng)力尾靜脈注射系統(tǒng)將10µg pCI-Luc (CMV啟動(dòng)子驅(qū)動(dòng)熒光素酶表達(dá)載體)運(yùn)送至小鼠。注射24小時(shí)后收集器官并測(cè)定熒光素酶活性。

實(shí)驗(yàn)室小鼠肝臟中實(shí)現(xiàn)長(zhǎng)期表達(dá)的載體系統(tǒng)

特點(diǎn)：

持續(xù)的基因表達(dá)-注射后8個(gè)月，小鼠肝臟實(shí)現(xiàn)長(zhǎng)期的肝臟基因表達(dá)

通用平臺(tái)-可用于表達(dá)LacZ或SEAP的陽(yáng)性對(duì)照載體

pLIVE載體中的啟動(dòng)子在肝臟長(zhǎng)期表達(dá)方面優(yōu)于CMV啟動(dòng)子。pLIVE-SEAP載體(20 μg)和pCMV-SEAP (10 μg, CMV啟動(dòng)子驅(qū)動(dòng)的SEAP載體)分別通過(guò)水動(dòng)力尾靜脈注射系統(tǒng)和TransIT-QR水動(dòng)力運(yùn)送液(MIR 5240)給4只ICR小鼠。 在注射后的指/定天數(shù)，收集每只小鼠的血清，使用Phospha-Light™SEAP測(cè)定試劑盒(Applied Biosystems)測(cè)定SEAP活性水平。比較每組的平均SEAP活性。

水動(dòng)力尾靜脈注射pLIVE-lacZ載體后ß-半乳糖苷酶在肝臟的強(qiáng)表達(dá)。 pLIVE-lacZ載體(圖A)通過(guò)流體動(dòng)力尾靜脈注射系統(tǒng)和TransIT-QR流體動(dòng)力運(yùn)送溶液(MIR 5240)被輸送到ICR小鼠體內(nèi)。注射24小時(shí)后，取肝臟切片，X-gal染色，檢測(cè)ß-半乳糖苷酶活性(藍(lán)色細(xì)胞)。 然后用蘇木精和伊紅Y復(fù)染細(xì)胞，分別染色細(xì)胞核和細(xì)胞質(zhì)。 圖B中的對(duì)照組小鼠(lacZ陰性)與圖A平行染色，未發(fā)現(xiàn)ß-半乳糖苷酶活性。 

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