Mabtech：如何避免類風濕因子和嗜異性抗體影響您的ELISA結果

什么是類風濕因子（rheumatoid factor）？

RF(類風濕因子)是許多不同抗體的可變混合物；這些抗體中有些結合其他抗體，有些是自身抗體(結合自身抗原的抗體)。

什么是嗜異性抗體？（heterophilic antibodies）

嗜異性抗體可以結合其他抗體。在人類樣本中，這些抗體或者是結合人類免疫球蛋白的自身抗體，或者是人類抗動物免疫球蛋白抗體(HAIA)，包括人類抗小鼠抗體(HAMA)。

類風濕因子和嗜異性抗體如何使ELISA結果不準確？

在夾心法ELISA中，匹配的抗體對用于捕獲和檢測可溶性分析物。當樣品中存在分析物時，正常情況可以測量到陽性信號(如圖1A所示)。然而，血清和血漿中的干擾因素，如類風濕因子(RF)和嗜異性抗體，會使檢測的capture和detection抗體交聯，從而導致假陽性信號和不準確的分析物定量(如圖1B所示)。交聯使得無法區分特異性和非特異性信號，最終導致結果不可靠。如果要消除干擾，通常需要加入額外的樣品預處理步驟，例如通過PEG 6000沉淀或免疫球蛋白阻斷去除抗體。

為了有效消除類風濕因子和嗜異性抗體所造成的假陽性信號，提高分析結果的可信度，Mabtech推出ELISA PathRF kits，在這種ELISA形式中，detection抗體采用重組的單克隆抗體，并加入專門的RF-block diluent，避免了干擾的風險。(如圖1C所示)

Mabtech的ELISA PathRF試劑盒已通過含RF血漿的驗證

使用一組不匹配的抗體來確定ELISA中獲得的信號是真信號還是假陽性信號。這樣一組不匹配的抗體由與*不同的蛋白質結合的capture和detection抗體組成。這種不匹配的設置不能產生真實的信號。然而，如果獲得了信號，這表明樣品中的RF因子交聯了capture和detection抗體，產生了假陽性信號。

在來自類風濕性關節炎患者的100份血漿樣品中，Mabtech使用不匹配的ELISA抗體組觀察到高頻率的假陽性結果。相比之下，ELISA PathRF沒有產生假陽性信號(圖2)。

圖2. Rheumatoid arthritis患者(n=100)的血漿在不匹配的ELISA(針對不同靶標的不匹配抗體組)或不匹配的ELISA PathRF中進行測量。

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